La măsurarea interacţiunilor rezultate între diferitele molecule din sistemele biochimice si biologice, sunt tot mai mult marginalizate tehnicile care se bazează pe marcarea moleculelor. Între metodele de testare care nu implică marcarea, un loc important îl ocupă metoda bazată pe măsurarea fenomenelor de rezonanţă la suprafaţă a plasmonilor (surface plasmon resonance), metodă adecvată măsurării interacţiunilor rezultate la suprafaţă. Cu ajutorul acesteia nu doar că se pot stabili interacţiunile ci se poate urmări întregul proces de interacţiune creat. În timpul măsurătorilor, moleculele care interacţionează, corespunzător selectate, sunt fixate pe o placuţă de aur de 50 nm grosime în timp ce moleculele pereche, care interacţionează cu acestea, circulă deasupra lor. Interacţiunile rezultate deasupra suprafeţei de aur iluminate pe partea opusă cu lumină monocromatică influenţează intensitatea fasciculelor de lumină reflectate la unghiuri diferite. Se pot astfel urmări interacţiunile formate si tăria acestora. Această metodă este excelentă pentru testarea interacţiunilor anticorp – antigen, proteină – proteină, receptor – ligand, proteină – ADN, proteină – virus, proteină – celulă.
Sistemele modulare ale echipamentelor Reichert cu două canale pentru rezonanţă la suprafaţă a plasmonilor (surface plasmon resonance, SPR) sunt:
- modulul SR7500DC care conţine componentele optice şi electronice necesare măsurătorilor. Locul de măsurare se află pe o prismă de safir care nu poate fi zgâriată, temperatura se poate regla între 10-70 oC
- pompa cu seringă SR8500 pentru aplicarea probei şi asigurarea unui debit fără pulsaţii. În cazul cantităţilor mici de probă pompa oferă posibilitatea de a mişca lichidul cu o mişcare de dute-vino în celula de flux
- valva de schimbare SR8600 controlată din calculator, care selectează între celulele de pe SR7500DC în aşa mod încât lichidul să treacă doar printr-o celulă sau prin ambele
- injector semiautomat SR8300 controlat din calculator, cu umplere manuală, cu buclă de probă schimbabilă
- injector automat de probe SR8100, cu răcire până la 4oC, cu tubulatură PEEK biocompatibilă, capacitate de injectare din microplăci cu 96 sau 384 locuri, respectiv din vialuri de 1,5 si 10 ml
- software Autolink pentru punerea în aplicare a etapelor de asociere, echilibru si disociere
Sistemul 4SPR este modelul cel mai recent din rândul aparatelor Reichert pentru măsurarea rezonanţei la suprafaţă a plasmonilor (SPR). Sistemul avansat cu patru canale poate functiona cu o eficientă triplă comparativ cu aparatele cu două canale, în timp ce poate asigura aceeași precizie, fiabilitate și flexibilitate ca și aparatul SR7500DC. Cele 4 canale pot fi folosite în configurația de 3 canale de probe și un canal de referință sau și de 2 canale de probe și 2 canale de referință.
Sistemul include detectorul optic, celula de detecție termostatabilă cu patru canale, pompa necesară pentru fluxul de lichide, degazorul și autosamplerul cu compartimentul de probe termostatabil. Comanda sistemului este asigurată de softul Reichert4SPR, care face posibilă proiectarea și execuția simplă dar eficientă a experimentelor, într-un mediu modern.
- celulă de măsură E-SPR pentru determinări simultane de SPR si electrochimice
- celulă de măsură cu fereastră din cuarţ, cu aceasta se pot
efectua determinări în cazul tehnicilor de imobilizare induse de radiaţie, a fotopolimerizărilor sau determinări optice - disc senzor SPR aurit
- disc senzor SPR cu suprafaţa acoperită cu 10% mSAM (10% alkane thiol (PEG)6-COOH, 90% alkane thiol (PEG)3-OH)
- disc senzor cu suprafaţă Ditiol SAM/COOH
- disc senzor SPR cu suprafaţă Ni-NTA (nickel-nitrilotriacetic acid), pentru proteine marcate poly-His
- disc SPR cu suprafaţă alchil hidrofobă de ex. pentru molecule lipidice
- disc senzor SPR cu streptavidin, pentru molecule marcate cu biotonă
- disc senzor SPR cu suprafaţă hidrogel 3D cu grosime de 200 nm (carboximetildextran)
- disc senzor SPR cu suprafaţă hidrogel 3D de 150 nm (policarboxilat)
